• laboratorium-217043_1280

Hoe vervuiling in de celfabriek op te ruimen

Zodra de cellen waarin we kweken

cel fabriekzijn besmet, de meeste ervan zijn moeilijk te hanteren.Als de besmette cellen waardevol en moeilijk opnieuw te verkrijgen zijn, kunnen de volgende methoden worden gebruikt om ze te verwijderen.

1. Gebruik antibiotica

Antibiotica zijn effectiever in het doden van bacteriëncel fabrieken.Combinatiemedicatie is effectiever dan medicatie alleen.Preventieve medicatie is effectiever dan medicatie na besmetting.Preventieve medicatie maakt doorgaans gebruik van een dubbel antibioticum (penicilline 100u/ml plus streptomycine 100μg/ml).Na besmetting moet de reinigingsmethode 5 tot 10 keer groter zijn dan de gebruikelijke hoeveelheid.Het medicijn moet 24 tot 48 uur na de toevoeging worden gebruikt en daarna worden vervangen door de gebruikelijke routine.Cultuur vloeistof.Deze methode kan effectief zijn in de vroege stadia van besmetting.Naast penicilline en streptomycine kunnen tot de gebruikte antibiotica ook gentamicine, kanamycine, polymyxine, tetracycline, nystatine enz. behoren. Veelgebruikte antibiotica zijn 400 tot 800 μg/ml kanamycine of 200 μg/ml tetracycline.Het medium wordt elke 2 tot 3 dagen ververst en gedurende 1 tot 2 generaties doorgegeven voor behandeling.De afgelopen jaren is gemeld dat 4-fluor, 2-hydroxyquinoline (Ciprofloxacine, Cip), Pleu-romutilin-derivaat (Pleu-romutilin-derivaat, BM-Cyclin2: BM-1 en tetracycline-derivaat (BM-2)) antibiotica zijn effectief bij het doden van mycoplasma wanneer het alleen of in combinatie wordt gebruikt.Deze drie antibiotica worden allemaal bereid in 250X geconcentreerde oplossingen in PBS en bewaard bij -20°C voor later gebruik.De gebruiksconcentratie Cip is 10 μg/ml, BM-1 is 10 μg/ml en BM-2 is 5 μg/ml.Bij gebruik eerst het verontreinigde kweekmedium opzuigen, RPMI1640-kweekmedium met BM-1 toevoegen, vervolgens het kweekmedium na 3 dagen opzuigen, RPMI1640-kweekmedium met BM-2 toevoegen en 4 dagen kweken, enzovoort gedurende 3 opeenvolgende dagen .rondes, totdat door 33258 fluorescerende kleuringsmicroscopie wordt bewezen dat mycoplasma is geëlimineerd, waarna normaal kweekmedium 3-4 keer wordt toegevoegd voor kweek en passage.

Hoe vervuiling in de celfabriek op te ruimen1

2. Verwarmingsbehandeling

Het incuberen van besmette weefselkweek bij 41°C gedurende 18 uur kan mycoplasma doden, maar heeft nadelige effecten op de cellen.Daarom moet vóór de behandeling een voorafgaande test worden uitgevoerd om de verwarmingstijd te onderzoeken die mycoplasma maximaal kan doden en de minste impact op de cellen heeft.Deze methode is soms onbetrouwbaar.Als het eerst met medicijnen wordt behandeld en vervolgens wordt verwarmd tot 41°C, zal het effect beter zijn.

3. Gebruik mycoplasma-specifiek serum

Mycoplasmabesmetting kan worden verwijderd met 5% konijnenmycoplasma-immuunserum (hemagglutinatietiter 1:320 of hoger).Omdat het specifieke antilichaam de groei van mycoplasma kan remmen, wordt het 11 dagen na antiserumbehandeling negatief en blijft het 5 maanden later negatief.is negatief.Deze methode is echter lastiger en niet zo handig en economisch als het gebruik van antibiotica.

4. Andere methoden

Naast de hierboven genoemde methoden voor het verwijderen van besmetting, zijn er ook inentings- en sterilisatiemethoden bij dieren, macrofaag-fagocytosemethoden, methoden voor het toevoegen van bromouracil aan besmettecultuur flessenen ze vervolgens te bestralen met licht en filtratiemethoden, enz., maar ze zijn allemaal lastiger en ineffectiever.Daarom wordt, zodra mycoplasmabesmetting optreedt, deze doorgaans weggegooid en opnieuw gekweekt, tenzij deze van bijzonder belangrijke waarde is.

neem dan contact op met Whatsapp & Wechat: +86 180 8048 1709


Posttijd: 24 oktober 2023